當前位置：首頁 > 一步法ELISA試劑盒 > 其他ELISA試劑盒> 科研 犬狂犬病毒糖蛋白(RVGp)定性檢測試劑盒
| 反應種屬 | 犬 |
| 檢測范圍 | 判定陰陽性 |
| 物理性能 | 試劑盒的各液體組分應澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝，無破損漏氣。 |
| 用途 | 用于定性檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中犬狂犬病毒糖蛋白（RVGp）。 |
| 實驗原理 | 試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被犬狂犬病毒糖蛋白（RVGp）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標本、陰性和陽性對照，再加入HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的犬狂犬病毒糖蛋白（RVGp）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD值），判定陰陽性。 |
| 特異性 | / |
| 重復性 | 板內變異系數小于15%。 |
| 回收率 | / |
| 試驗所需自備試驗器材 | 1、酶標儀（450nm） 2、高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3、37℃恒溫箱 4、蒸餾水或去離子水 |
| 操作程序 | 1、從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。 2、設置陰性對照孔、陽性對照孔和樣本孔，陰性、陽性對照孔各加 50μL 對照品，樣本孔中加入待測樣本 50μL，空白孔不加。 3、除空白孔外，對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 4、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。 5、每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。 6、每孔加入終止液 50μL，15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。 |
| 注意事項 | 1、嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。 2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。 3、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。 4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。 5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。 6、在儲存和溫育時避免強光直接照射。 7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 8、任何反應試劑不能接觸漂白 |
| 問題分析 | ①問題描述：標準曲線差 可能原因及相應對策： 1.試劑盒平衡時間不夠——不低于 2 個小時的室溫平衡 2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌 3.移液不精確——檢查和校正移液器 ②問題描述：精密度低 可能原因及相應對策： 1.洗滌不充分——按說明書要求充分洗滌和浸泡 2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑 3.重復利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模 4.加樣不精確——檢查和校正移液器 ③問題描述：O.D值低 可能原因及相應對策： 1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器，精確加入試劑 2.溫育時間不正確——保證充足的溫育時間 3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度 4.酶標記物或底物失效——通過混合酶標記物和底物，顏色迅速顯現來檢查 5.沒有加入終止液——按照說明書實驗操作步驟加入終止液 6.超出讀數時間讀數——在說明書推薦的讀數時間內讀數 ④問題描述：樣本值 可能原因及相應對策： 1.不正確的樣本儲存方式——正確儲存樣本，使用新鮮樣本進行實驗 2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法 3.待測物質在樣本中含量低——使用新鮮樣本，重復實驗 |
| 聲明 | 該試劑盒僅供研究使用，如將其用于臨床診斷或任何其他用途，我公司將不對因此產生的問題負責，亦不承擔任何法律責任。 |
ELISA試劑盒常見問題與解析
問題表現：標準曲線的R²值低于0.99，甚至出現“S”形或雜亂無章的趨勢。
可能原因：
標準品稀釋錯誤（梯度沒做好或混勻不充分）。
標準品反復凍融導致降解。
酶標板洗滌不徹底，孔間殘留液體影響吸光度。
解決方案：
標準品現配現用，避免多次凍融，稀釋時嚴格按說明書操作。
確保洗滌步驟規范，洗板機噴嘴無堵塞，手工洗板時甩干并拍干。
如果曲線仍不理想，嘗試更換標準品或檢查酶標儀波長是否準確。
問題表現：樣本OD值接近空白孔，無法有效檢測目標蛋白。
可能原因：
樣本中目標蛋白濃度過低（低于檢測下限）。
抗體失效或孵育時間/溫度不足。
樣本處理不當（如反復凍融、未加蛋白酶抑制劑）。
解決方案：濃縮樣本（超濾離心）或換用高靈敏度ELISA試劑盒。
檢查抗體有效期，確保孵育時間充足（可適當延長）。
新鮮樣本優先，避免反復凍融，必要時添加保護劑。
問題表現：空白孔或陰性對照OD值偏高，影響結果判讀。
可能原因：
封閉不充分（封閉液選擇不當或時間不足）。
抗體交叉反應或非特異性結合。
洗滌不徹底，殘留試劑導致假陽性。
解決方案：
優化封閉條件（常用BSA或脫脂奶粉，封閉時間可延長至1-2小時）。
增加洗滌次數（如從3次增至5次），確保每孔洗滌液加滿。
更換特異性更高的抗體，或調整一抗/二抗稀釋比例。
問題表現：同一批樣本檢測，孔間差異大，CV值超過20%。
可能原因：
加樣操作不一致（手法、速度差異）。
酶標板邊緣效應（邊緣孔蒸發快，溫濕度不均）。
試劑未平衡至室溫直接使用。
解決方案：
使用多通道移液器，統一加樣速度和角度。
孵育時覆蓋板蓋，避免邊緣孔干燥，可棄用邊緣孔作空白。
所有試劑使用前室溫平衡30分鐘，避免溫度差異影響反應效率。
1.樣本處理：血清/血漿避免溶血，細胞裂解液需離心去除碎片，組織樣本勻漿充分。
1.
2.試劑保存：抗體、酶結合物等按說明書要求保存（-20℃分裝避免反復凍融）。
3.儀器校準：定期檢查移液器準確性，酶標儀做波長和光路校準。
4.對照設置：每板必設空白孔、陰性對照和陽性對照，監控系統誤差。
如果實驗結果異常，可以按以下步驟快速排查：
檢查試劑：是否過期？是否正確保存？
回顧操作：孵育時間、溫度、洗滌步驟是否規范？
分析數據：標準曲線是否正常？對照是否符合預期？
重復實驗：換新試劑或調整條件后重試。
ELISA雖然操作簡單，但“細節魔鬼”常常藏在加樣、洗滌、孵育這些基礎步驟里。遇到問題時，耐心對照說明書、排查關鍵環節，往往能事半功倍。如果反復失敗，不妨聯系試劑盒技術支持——畢竟，好的實驗結果=靠譜的試劑+規范的操作+一點點的運氣！
You Keep Us Running
顧客至上,品質服務
客戶服務--如果我們不能使客戶滿意，會有其他人這么做！
客戶是我們的服務，產品質量的定義者，秉持：誠信原則，非常重視客戶的意見與感受；在所提供的品質產品及服務中獲得合理利潤的前提下，使我們尊敬的客戶滿意是至關重要的！因為如果我們做不到，會有其他人這么做。
服務是由員工承載的，如果我們要取得更大的成功，希望我們每一位員工都必須以極強的職業精神，積極、負責、坦誠，令我們的客戶滿意！
老師們如果對我們服務有任何意見或在任何環節受到不公正待遇，敬請聯系我們，我們將及時回復您，非常感謝！
客戶服務承諾
1. 客戶服務--如果我們不能使客戶滿意，會有其他人這么做。 向以“服務、客戶、技術”為根本�？蛻羰� 的核心；客戶是我們的服務、產品質量的定義者， 秉持：誠信原則，非常重視客戶的意見與感受；在所提供的品質產品及服務中獲得合理利潤的前提下，使我們尊敬的客戶滿意是至關重要的！因為如果我們做不到，會有其他人這么做。
2. 報價過程中，業務員有義務使客戶方充分了解并理解產品型號、技術指標、性能、使用場合、安全注意事項等，以保證客戶方在合同簽定前作出正確選擇。如果客戶在交貨前就產品型號提出變更建議， 將給予溝通與配合，以滿足客戶的合理要求，對于型號不可變更之訂單， 員工將在合約簽定前認真與客戶書面確認，以減少給客戶造成不必要的麻煩和損失。
3. 如因運輸造成的貨物損壞，由我司與運輸方協調解決，客戶不承擔由此產生的損失，同時會努力避免此類現象發生。貨物送達客戶現場并簽收后，強烈建議客戶對所送達的貨品的外觀、數量、配件等方面進行、仔細的現場驗收， 將盡可能地避免交貨后再次出現貨損等與物流配送有關的問題。在使用過程中， 將一直注重客戶感受，妥善處理各種售后服務事宜。收貨后3天內未提出有運輸中貨損時，則默認為本次貨物完好收到。
4. 非一次性使用產品在質量保證期內發生產品質量原因、非使用不當、非人為因素損壞、非第三方因素造成等，將在接到客戶電話或書面通知后及時對此進行妥善協調。收貨30天內（以運單簽收日期為準）如發現產品質量問題，請及時與客服聯系。逾期不予受理。問題產品保持包裝完整(請自帶包裝，勿直接在產品原廠外盒粘貼或書寫)。請用郵局平郵或客戶自行選擇方式退回，運費我公司支付。
5. 退貨前請先與客服溝通，請配合填寫售后服務表，并與綜合客服聯系獲得售后服務號，以便跟蹤您的退貨獲得及時處理�？蛻魧Ξa品顏色或款式的指定，我們會盡力滿足，但不能100%保證。如因顏色或款式不相符將不予以退換貨。為了更好的服務于客戶，售后服務專員將定期電話、傳真或EMAIL就產品使用狀況對客戶進行跟蹤及滿意度調查。
6、對于把非泉州睿信生物科技有限公司所售商品寄到我公司的情況，我們保留對本次全部退換貨不處理直接返給客戶的權利。
7、以下條件不能享受退換：退回的產品包裝損毀或不完整、產品配件或相關資料不齊、未經授權擅自修理或改裝、未按正常方法使用或貯存、超出售后服務期限的商品。
8、售后服務是公司基本的服務，我們愿意為大家提供良好的售后服務，同時良好的售后服務也需要客戶的配合，請在退換貨前仔細閱讀以上說明，盡可能按公司以上規定辦理，以免影響對您的售后服務。
9、如果老師們對客戶服務承諾有疑問、顧慮或擔心，敬請直接聯系我司在線服務人員或來電來函咨詢。希望老師們對我們的服務及工作提出意見，您的滿意是我們工作的動力，祝您生活工作愉快！謝謝！
產品分類
聯系我們
服務熱線
掃一掃，加微信客服
版權所有：泉州市睿信生物科技有限公司 | 閩ICP備18019542號 | 技術支持：阿儀網
