• <table id="qqcqq"><strong id="qqcqq"></strong></table>
  • 科研 小鼠雙氫睪酮(DHT)檢測試劑盒

    產品品牌:睿信生物 商品貨號:RXJW202626M

    文獻($TCount)

    說明書

    • 產品售價: 3000 2000
    • 產品規格: 96T 48T
    • 產品貨期:現貨
    • 保存溫度:2-8℃
    規格
    價格庫存
    • 商品詳情
    • 文獻
    • FAQ
    反應種屬 小鼠
    檢測范圍 2.5nmol/L-40nmol/L
    物理性能 液體組分應澄清,無沉淀或絮狀物;所有組分應無包裝破損。
    用途 定量檢測血清、血漿、細胞培養上清液、組織中小鼠雙氫睪酮(DHT)的含量。
    實驗原理 本試劑盒采用競爭ELISA法,往預先包被雙氫睪酮(DHT)抗體的微孔板中依次加入樣本/校準品和Asaay Diluent,經過溫育洗滌,再加入SA-HRP溫育。再次洗滌后加入底物TMB顯色,室溫顯色并用終止液終止反應后讀取OD值。OD值高低和樣品中的雙氫睪酮(DHT)呈負相關。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、重復性好、操作簡單、快速等特點,對血清中雙氫睪酮(DHT)的減少或升高有可靠的檢出性能。
    特異性 本試劑盒識別天然和重組小鼠雙氫睪酮(DHT),與結構類似物無交叉。
    重復性 批內變異系數 CV%小于 15%,批間變異系數 CV%小于 15%。
    回收率 回收率在 85%-115%之間
    試驗所需自備試驗器材 1、酶標儀(450nm)
    2、精密移液器及一次性吸頭
    3、蒸餾水
    4、洗瓶或者自動洗板機
    5、37℃水浴鍋或恒溫箱
    6、500ml 量筒
    操作程序 1. 將各種試劑移至室溫平衡兩小時,取濃縮洗滌液,根據當批檢測數量,用蒸餾水 1:20 稀釋,混勻后備用。
    2. 將預包被板從密封袋中取出,設一個空白對照孔,不加任何液體;每個校準品設 2 孔,每孔加入對應校準品 15μl;其余每個檢測孔直接加待測血清或質控品 15μl。
    3. 除空白孔外所有孔加入 Asaay Diluent 100μl,混勻,貼上封板膜,置 37℃溫育 60 分鐘。
    4. 手工洗板:棄去孔內液體,洗滌液注滿各孔,靜置 10 秒甩干,重復 3 次后拍干。洗板機洗板:選擇洗滌 3 次程序洗板后拍干。
    5. 每孔加入 SA-HRP 100μl(空白對照孔除外),混勻,貼上封板膜,置 37℃溫育 30 分鐘。
    6. 手工洗板:棄去孔內液體,洗滌液注滿各孔,靜置 10 秒甩干,重復 3 次后拍干。洗板機洗板:選擇洗滌 3 次程序洗板后拍干。
    7. 每孔加 TMB 100μl,振蕩混勻后,置 37℃避光顯色 15 分鐘,每孔加終止液 100μl。用酶標儀讀數,取波長450nm,先用空白對照孔調零點,然后測定各孔光密度值(OD值)。
    注意事項 1:如果試劑盒的組份需要再次使用,請確保上一次使用之后沒有被污染。
    2:酶標板單次未使用完,要謹記密封放到 2-8℃保存。
    問題分析 ①問題描述:標準曲線差
    可能原因及相應對策:
    1.試劑盒平衡時間不夠——不低于 2 個小時的室溫平衡
    2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌
    3.移液不精確——檢查和校正移液器
    ②問題描述:精密度低
    可能原因及相應對策:
    1.洗滌不充分——按說明書要求充分洗滌和浸泡
    2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑
    3.重復利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模
    4.加樣不精確——檢查和校正移液器
    ③問題描述:O.D值低
    可能原因及相應對策:
    1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器,精確加入試劑
    2.溫育時間不正確——保證充足的溫育時間
    3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度
    4.酶標記物或底物失效——通過混合酶標記物和底物,顏色迅速顯現來檢查
    5.沒有加入終止液——按照說明書實驗操作步驟加入終止液
    6.超出讀數時間讀數——在說明書推薦的讀數時間內讀數
    ④問題描述:樣本值
    可能原因及相應對策:
    1.不正確的樣本儲存方式——正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗
    2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法
    3.待測物質在樣本中含量低——使用新鮮樣本,重復實驗
    聲明 該試劑盒僅供研究使用,如將其用于臨床診斷或任何其他用途,我公司將不對因此產生的問題負責,亦不承擔任何法律責任。

     ELISA試劑盒常見問題與解析

    ELISA(酶聯免疫吸附試驗)作為實驗室的“金牌檢測員”,在疾病診斷、生物標志物檢測、藥物研發等領域大顯身手。但再成熟的技術,也可能因為一個小細節“鬧脾氣”——標準曲線擬合不佳、信號忽高忽低、背景噪音干擾……別擔心!睿信生物憑借多年ELISA研發經驗,幫你揪出問題根源,讓實驗數據穩穩當當!

    一、ELISA實驗常見問題大盤點

    1. 標準曲線“翻車”——擬合度差、線性不佳

    問題表現:標準曲線的R²值低于0.99,甚至出現“S”形或雜亂無章的趨勢。
    可能原因

    標準品稀釋錯誤(梯度沒做好或混勻不充分)。

    標準品反復凍融導致降解。

    酶標板洗滌不徹底,孔間殘留液體影響吸光度。
    解決方案

    標準品現配現用,避免多次凍融,稀釋時嚴格按說明書操作。

    確保洗滌步驟規范,洗板機噴嘴無堵塞,手工洗板時甩干并拍干。

    如果曲線仍不理想,嘗試更換標準品或檢查酶標儀波長是否準確。

     

    2. 信號值太低——目標蛋白“隱身”了?

    問題表現:樣本OD值接近空白孔,無法有效檢測目標蛋白。
    可能原因

    樣本中目標蛋白濃度過低(低于檢測下限)。

    抗體失效或孵育時間/溫度不足。

    樣本處理不當(如反復凍融、未加蛋白酶抑制劑)。
    解決方案:濃縮樣本(超濾離心)或換用高靈敏度ELISA試劑盒。

    檢查抗體有效期,確保孵育時間充足(可適當延長)。

    新鮮樣本優先,避免反復凍融,必要時添加保護劑。

    3. 背景信號高——全是“噪音”怎么辦?

    問題表現:空白孔或陰性對照OD值偏高,影響結果判讀。
    可能原因

    封閉不充分(封閉液選擇不當或時間不足)。

    抗體交叉反應或非特異性結合。

    洗滌不徹底,殘留試劑導致假陽性。
    解決方案

    優化封閉條件(常用BSA或脫脂奶粉,封閉時間可延長至1-2小時)。

    增加洗滌次數(如從3次增至5次),確保每孔洗滌液加滿。

    更換特異性更高的抗體,或調整一抗/二抗稀釋比例。

    4. 重復性差——同一樣本結果忽高忽低

    問題表現:同一批樣本檢測,孔間差異大,CV值超過20%。
    可能原因

    加樣操作不一致(手法、速度差異)。

    酶標板邊緣效應(邊緣孔蒸發快,溫濕度不均)。

    試劑未平衡至室溫直接使用。
    解決方案

    使用多通道移液器,統一加樣速度和角度。

    孵育時覆蓋板蓋,避免邊緣孔干燥,可棄用邊緣孔作空白。

    所有試劑使用前室溫平衡30分鐘,避免溫度差異影響反應效率。

    二、ELISA實驗小貼士:細節決定成敗

    1.樣本處理:血清/血漿避免溶血,細胞裂解液需離心去除碎片,組織樣本勻漿充分。

    1. 

    2.試劑保存:抗體、酶結合物等按說明書要求保存(-20℃分裝避免反復凍融)。

    3.儀器校準:定期檢查移液器準確性,酶標儀做波長和光路校準。

    4.對照設置:每板必設空白孔、陰性對照和陽性對照,監控系統誤差。

    三、遇到問題別慌!ELISA排查流程圖

    如果實驗結果異常,可以按以下步驟快速排查:

    檢查試劑:是否過期?是否正確保存?

     

    回顧操作:孵育時間、溫度、洗滌步驟是否規范?

     

    分析數據:標準曲線是否正常?對照是否符合預期?

     

    重復實驗:換新試劑或調整條件后重試。

    ELISA雖然操作簡單,但“細節魔鬼”常常藏在加樣、洗滌、孵育這些基礎步驟里。遇到問題時,耐心對照說明書、排查關鍵環節,往往能事半功倍。如果反復失敗,不妨聯系試劑盒技術支持——畢竟,好的實驗結果=靠譜的試劑+規范的操作+一點點的運氣!

    我要詢價
    *聯系方式:
    (請正確填寫手機號,您的聯系方式不會被公開)
    *內容:


    掃一掃,加微信客服

    客服電話:

    400-833-2227

    15260335612

    久久国产精品无码_黄色无码视频在线观看_在线免费观看a视频_国产美女A级毛片视频_国产欧美日韩综合视频专区_av老司机av天堂